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北京毕特博生物技术有限责任公司销售部

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国内哪家公司代理有VEGF的EBM-2培养基,仅毕特博生物
发布时间:2013-09-07        浏览次数:433        返回列表

请教:
国内哪家公司代理有VEGF的EBM-2培养基。

是毕特博吗。

寒冰 wrote:
请教:
国内哪家公司代理有VEGF的EBM-2培养基。

是毕特博吗。  400-833-9299


我查到的也就只有这家

以下是来源网址的具体内容:
http://www.med66.com/html/ziliao/yixue/19/23da6eee3d452c3c3ea8e61068369229.htm
请问用什么培养液好啊
tonywujun wrote:
同志们,这段时间养小鼠骨髓来源的EPC出现奇怪现象,其中一些细胞4天后快速增殖,迅速形成片状集落,细胞可以排列形成线样结构,且可以融合,有些还有分支,形成的结构很像带有分支的血管,奇怪了,我从来没有见过这种细胞,请各位战友帮忙看看这可能是什么细胞。
一张100倍的图


应该是瓶子上的划痕留下的。细胞沿着划痕生长,看看我养的细胞,更漂亮。呵呵,当时觉得不可思议。其实,是个肝癌细胞而已。

(缩略图,点击图片链接看原图)

不过,我做实验,发现好多次,原代EPC培养的时候,确实会出现部分细胞连接成环状,几乎每次原代都可以发现。可以肯定,不是划痕所造成的,下图是比较典型的一张,偷懒,没有用摄像头拍,用数码相机拍的,所以拍摄效果不太好。‘

(缩略图,点击图片链接看原图)

个人同意yulinlong战友的观点。
yulinlong战友的图片又多又漂亮,与他相比真是逊色多了,
匿了。

首先我肯定的是这不是fibronectin划痕造成的结果,培养皿内形成的片状细胞团块很大,目前已经对此细胞进行了lectin和CD31的免疫荧光鉴定,不表达,基本上表明其不是内皮及其前体细胞,具体是什么细胞还不清楚,但从形态上讲,不像成纤维细胞、内皮细胞、平滑肌细胞、骨骼肌细胞、心肌细胞,不管怎样,以前从来没有见过,且比较了所有相关帖子上的细胞,没有见到相类似的细胞,真是郁闷呀,哪位高人提供一下线索呀。

用国产淋巴细胞分离液分离、提取白膜层后老是混有较多的红细胞,其影响单个核细胞的贴壁。本人所在实验室建议使用蒸馏水破除。
请问各位高手,你们是怎么处理这些红细胞的?
另外使用羟乙基淀粉法效果好吗?


小小鸟 wrote:
八戒兄:
你在实验中也能将外周血单核细胞浓度调整到1*10的9次方/L?真是羡慕啊。不过听我师姐说外周血单核细胞不多,要将10 ml的血分离出这么多单核细胞我还是有点诧异。请问八戒兄也是用10ml血分离的吗?


1*10的9次方/L只是个浓度问题,并不是个数量,10ml血分离1*10的9次方/L×
10ml,是不是?

1*10的9次方/L只是个浓度问题,并不是个数量,10ml血分离1*10的9次方/L×
10ml,是不是?

这个我明白,但我从文献上看到:成年循环EPCs数量非常有限(100~500个/ml),照1*10的9次方/L×10ml这样算,10ml外周血有10的7次方EPCs,还是跟文献不符啊

请教:
国内哪家公司代理有VEGF的EBM-2培养基。

是毕特博吗。


寒冰 wrote:
请教:
国内哪家公司代理有VEGF的EBM-2培养基。

是毕特博吗。


我查到的也就只有这家

在学习了playingstone 战友的2篇大作(一篇已经发表:生物医学工程与临床,2005,7,9(4)243~246.恭喜恭喜)之后,受益颇丰:
1.playingstone 战友培养方法比较有新意,综合了目前2种有争论的培养方法。我想问下48h内贴壁细胞和48h后贴壁细胞中内皮祖细胞的纯度比较问题,哪个更纯一些?也就是说哪个内皮祖细胞含量更多些?
2.playingstone 战友采用骨髓来源的培养方法,在用密度为1.071的淋巴细胞分离液(上海华精生物制品厂)进行梯度密度离心分离单核细胞,18℃,1500r/min离心23min后。想问下,实验室采用的是什么离心机,哪个厂家的。因为我们自己也在用这种淋巴细胞分离液,效果很不好,用的是Beck man高效离心机,400g,30min,效果很差,几乎看不到白膜层,连红细胞都没离心下来,试剂是刚买的,未过期。很是郁闷。
3.playingstone 战友在离心后,似乎未经过洗这一步,就直接制成细胞悬液,是不是在骨髓来源的培养方法中是这样的呢,有点疑问?呵呵
谢谢,欢迎讨论!
一般是800G的离心力,既然你的机子是400G 那就把转速适当调高就是,比方现在是1500R/M,先调到2500R/M左右试试。,


小小鸟 wrote:
八戒兄:
你在实验中也能将外周血单核细胞浓度调整到1*10的9次方/L?真是羡慕啊。不过听我师姐说外周血单核细胞不多,要将10 ml的血分离出这么多单核细胞我还是有点诧异。请问八戒兄也是用10ml血分离的吗?


我是10毫升分大约10的7 单个核细胞的

两个问题:
1.UEA-I和DiLDL双染色阳性细胞为正在分化的EPCs的原理是什么?而且我见一篇文献竟然用是否DiLDL染色阳性区别EPC和EC,不解
2.有用多聚赖氨酸代替Fn包板的吗?

请都各位,我准备培养大鼠的EPC,不知大家所用的VEGF和b-FGF是哪家公司的,有小包装吗?

下面是一篇blood上的如何培养EPC的文献,希望对大家有用。文件太大(475kb),不能上传,所以给出全文摘要。

EPC生长特征.doc (35.0k)

我们买的VEGF是 sigma公司的,2微克包装的,500块钱,bFGF没买,我们用的是M199培养基+VEGF+PEX+20%FBS养的兔的EPC,效果还行。
以前用的是EGM培养基,后来有一阵子EGM国内缺货,就改用了上述配方。
两种相比较,EGM培养基培养细胞的状态稳定一些,而且细胞生长较均匀,现在用的这这种培养基养的EPC原代的时候全部成簇状生长,也就是说一个培养瓶里长几大团细胞,没有细胞簇的地方几乎都是空的。长了6天以后有细胞的地方非常密,我们就消化,把细胞吹下来后还是放在原瓶里长,细胞就长得比较均匀了,生长速度也还可以。
以前用EGM时我们用的是5%血清浓度,现在用M199是20%血清浓度,但是感觉还是没有EGM时长得快。

请教大家:
加VEGF诱导骨髓细胞应在什么时候加?大概传几代啊?


寒冰 wrote:
请都各位,我准备培养大鼠的EPC,不知大家所用的VEGF和b-FGF是哪家公司的,有小包装吗?

下面是一篇blood上的如何培养EPC的文献,希望对大家有用。文件太大(475kb),不能上传,所以给出全文摘要。


帮你把全文上传下
分成2部分,都下载后,放在同一个文件下,然后解压part1就可以了。

2577.part1.rar (244.14k)

22222222222222222222222222222

2577.part2.rar (211.6k)

请问cici_wl 师兄:

你是培养大鼠EPC吗,EGM是哪家公司的,培养板包被了吗,是自己包的吗?

谢谢。

playingstone前辈,请教您一下:
骨髓源的内皮祖细胞是本身就存在于骨髓的,而不是由MSCs分化而来的吗?如果是,它的前身是什么?
MSCs能不能分化为内皮祖细胞,还是只能分化为成熟内皮细胞?
我见到的文献好像不管是骨髓、外周血、脐血的内皮祖细胞,都是直接就用内皮细胞诱导培养基培养。就您所知,有没有先扩增MSCs,再将其诱导为EPCs的?

请问各位:你们消化EPC时候,觉得好消化吗?含EDTA的胰酶大概要作用多久啊?
我消化了15分钟(37度),吹打了几次才勉强下来!!

请问:

用DMEM低糖 和 高糖 的培养基对细胞的影响是什么呢?为什么MSC要用低糖的呢?

恳请指教。谢谢!

harry158:

你好,我也打不开下面这篇综述,能否发一份到邮箱(newbyte163@163.com)

综述
(blood ,106,1525-1531).

我已经分离了数次脐血里的EPC,大家说的这些我好象似曾见过,可鉴定时总是CD133(-)和CD34(-),但每次贴负在FIBRONECTIN上细胞也不少,我真不知道如果不是EPC会是什么,作了快3个月了,一直这样,都快崩溃了,大家帮我出出主意吧,多谢.

meini:
这片文献上有很漂亮的EPC集落 "Granulocyte Colony-Stimulating Factor Mobilizes Functional Endothelial Progenitor Cells in Patients With Coronary Artery Disease"(Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2005;25:296-301.)
是pdf 文件,不知道怎么上传,如果有需要请告诉我邮箱.
我的邮箱是newbyte163@163.com,非常感谢.

求合购:

我现已问好小鼠CD 133 和FLK-1 上流式检测抗体,最小包装分别为25微克和50微克。(为Biosource公司产品)(都可以上100管以上)

由于本人只能用一半的量。价钱比较昂贵。想找位战友一起分享。我在武汉。有意者请与我联系。qq 358228927。 手机:13476210795

急!!急!!急!!

不好意思,才回贴。前一段时间出去开会。
现在EPC培养有些进展,也拍了图片,但我的图片都比较大,不能上传,如你感兴趣我可以发给你。从形态、FCM还是IHC均是EPC。

请问羟乙基淀粉沉淀红细胞怎么做?

不好意思,才回贴。前一段时间出去开会。
现在EPC培养有些进展,也拍了图片,但我的图片都比较大,不能上传,如你感兴趣我可以发给你。从形态、FCM还是IHC均是EPC。

请问羟乙基淀粉沉淀红细胞怎么做?

楼上的PDF文件均打不开,各位都能否MAIL给我。再次感激不禁。我有的东西,不会让各位失望的。多多交流。xiexie
my mail: dryudecai@hotmail.com

强烈建议我们开个网络会议!
方式: Hotmail MSN
时间待定:大家商量
我想一起聊天,可能效果更好

为表诚意,我先贴有关EPC的reriew。
多指教

 

毕特博生物 400-833-9299